首先人員上的規(guī)定：各級(jí)擴(kuò)培人員的無菌意識(shí)要高度一致，在實(shí)驗(yàn)室階段，一定嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程進(jìn)行；生產(chǎn)現(xiàn)場擴(kuò)培人員上崗前要換好指定工作服，擴(kuò)培操作前要用75%酒精擦拭雙手，避免發(fā)生交叉污染。
其次，對環(huán)境要求也非常嚴(yán)格：無種室應(yīng)按要求定期消毒，紫外線照射至少30min，實(shí)驗(yàn)儀器應(yīng)隨時(shí)在0.1MPa之下消毒20-30min；接種和添加麥汁過程之中的所有管道和閥門必須用熱水或蒸汽完全消毒。室內(nèi)地面和墻面也應(yīng)定期噴灑一定濃度的消毒劑進(jìn)行消毒滅菌。室內(nèi)空氣在接種前一天應(yīng)完全消毒，接種后應(yīng)進(jìn)行二次消毒。
然后是擴(kuò)培麥汁的要求：種子罐之前的麥汁盡量取頭號(hào)麥汁，加水調(diào)節(jié)濃度為11～120P ，滅菌要求0.1MPa，20～30min；也可經(jīng)過特殊處理后，進(jìn)行干熱滅菌，要求120℃恒溫3h；現(xiàn)場擴(kuò)培用麥汁為沉淀槽中的熱麥汁，濃度在120P左右，α-氨基氮應(yīng)在180～220mg/L，可添加適量的酵母營養(yǎng)鹽。麥汁滅菌方法同前。
最后是壓縮空氣：用于通風(fēng)和供氧的壓縮空氣，必須經(jīng)過三級(jí)膜過濾后才能使用。同時(shí)，氧氣含量要適當(dāng)，酵母在氧氣不足的情況下生長緩慢，而氧氣過多會(huì)造成酵母細(xì)胞呼吸酶活性過強(qiáng)，酵母繁殖過多不利于后期發(fā)酵。一般來說，在進(jìn)入培養(yǎng)罐之前，膨脹的培養(yǎng)酵母應(yīng)該每天充氣三次，每次20-30分鐘。
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